外植体消毒次氯酸钠,外植体消毒次氯酸钠的作用

weijier 2024-05-27 13

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大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于外植体消毒次氯酸钠的问题,于是小编就整理了3个相关介绍外植体消毒次氯酸钠的解答,让我们一起看看吧。

  1. 高中细胞工程流程?
  2. 组培生根培养基配方?
  3. 瓜蒌组培苗生产流程?

高中细胞工程流程?

植物细胞培养的基本过程主要包括的步骤:(1)从健康植株的特定部位或组织,如根、茎、叶、花、果实、花粉等,选择用于培养的起始材料,(2)用一定的化学药剂(最常用的有次氯酸钠、升汞和酒精等)对外植体表面消毒,建立无菌培养体系。这是获得培养成功的重要一步。(3)形成愈伤组织和器官,外植体块在培养基上形成疏松的愈伤组织,由愈伤组织分化出芽并可进一步诱导形成小植株。另一途径是用外植体或愈伤组织细胞经液体悬浮培养诱导胚壮体再长成植株。胚壮体的形成可大大提高繁殖效率,并可减少变异

动物细胞培养的主要步骤:(1)在无菌条件下,从健康动物体内取出适量组织,剪切成小薄片;(2)加入适宜浓度的酶与***物质进行消化作用使细胞分散;(3)将分散的细胞进行洗涤并纯化后,以适宜的浓度加在培养基中,于37°C下培养,并适时进行传代。(

外植体消毒次氯酸钠,外植体消毒次氯酸钠的作用
(图片来源网络,侵删)

组培生根培养基配方?

有效的组培生根培养基配方如下:

1、配制溶液。向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。

2、调节pH值 。

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(图片来源网络,侵删)

用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤。

用滤纸、纱布棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。

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(图片来源网络,侵删)

4、分装。

已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。如果要制作平培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

5、加棉塞 。

MS培养基配方 mg/L
大量元素

NH4NO3 1 650
KNO3 1 900
CaCl2·2H2O 440
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 700
微量元素:

KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MnO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
FeSO4·7H2O(27.8)+Na2-EDTA·2H2O(37.3)
有机成分

肌醇 100
烟酸 0.5
盐酸吡哆醇(维生素B6) 0.5
盐酸硫胺素(维生素B1) 0.5
甘氨酸 2


注意:肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液,因为它比较难溶,一般配成100倍,而除去肌醇后的有机,还是可以配成1000倍的。

瓜蒌组培苗生产流程?

s1、外植体选择:取雌性瓜蒌当年抽生的枝条,取枝条中部切成1cm的茎段,每个茎段上含有一个腋芽,将茎段用洗衣粉水溶液清洗,然后在流水下冲洗干净,然后将瓜蒌茎段用70%的乙醇浸泡50s,无菌水清洗2遍,再用10%次氯酸钠溶液浸泡5min,用无菌水冲洗3次,用无菌纸吸干表面水分;

s2、组培苗培养:将瓜蒌茎段置于培养室中,依次***用愈伤诱导培养基、增殖培养基和生根培养基中进行培养,得组培苗;

1)愈伤诱导培养:将瓜蒌茎段接种到愈伤诱导培养基进行培养,得到愈伤组织,所述愈伤诱导培养基为ms+1.0mg/l6-ba+0.5mg/lsa+0.5mg/l2,4-d+4.0g/l蔗糖+1.5g/l琼脂,调节ph至5.8,先在10℃下暗培养3d,然后在15℃下光照培养10d,光照时间12h/d,光照强度1500lx,得愈伤组织;

2)增殖培养:将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养,得到继代苗,所述增殖培养基为ms+0.3mg/l6-ba+0.2mg/lsa+0.2mg/lnaa+5.0g/l蔗糖+2g/l琼脂,调节ph至5.8,在18℃下光照培养10d,光照时间12h/d,光照强度2000lx,得继代苗;

3)生根培养:将继代苗转移到生根培养基进行生根培养,得组培苗,所述生根培养基为1/2ms+0.4mg/liba+0.1mg/lnaa+5.0g/l蔗糖+2g/l琼脂,调节ph至5.8,在20℃下光照培养10d,光照时间12h/d,光照强度2000lx,得组培苗;

到此,以上就是小编对于外植体消毒次氯酸钠的问题就介绍到这了,希望介绍关于外植体消毒次氯酸钠的3点解答对大家有用。

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