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观察有丝分裂的实验中酒精为何能固定细胞?
解离液中酒精的作用是迅速杀死细胞,固定细胞的分裂相;而盐酸的作用是使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。
在植物有丝分裂玻片标本制作中,固定液通常使用的是卡诺氏固定液(Carnoys fixative),这种固定液的成分是冰醋酸和乙醇。使用卡诺氏固定液的目的是为了将植物细胞杀死并固定,以保持细胞的形态和结构不变。
盐酸的作用:使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解。酒精的作用:迅速杀死细胞,固定细胞的分裂相,使其停止在有丝分裂的某一时期便于观察。溶解细胞间质,利于细胞解离,从而达到分离细胞的目的。
能使组织中的细胞相互分离开来;② 析出提取含杂质较少的DNA的原理:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。应用 ① 观察植物细胞的有丝分裂;② DNA的粗提取与鉴定。
乙醇固定细胞的原理
乙醇固定的原理:与水竞争蛋白质中的氢键,从而替代组织中的水分子,在影响蛋白质***结构的同时稳定其二级结构。乙醇对组织细胞的处理既有固定作用又有脱水作用,乙醇借沉淀作用使蛋白质变性。
穿透性强:乙醇固定细胞的原理是乙醇是一种小分子非极性物质,可以迅速渗透到细胞内部,能够维持细胞内抗原的原有状态,使细胞结构得以较好的保存,同时也有利于后续的染色实验。
用预冷的乙醇固定细胞是为减少DNA降解,用常温的乙醇会无法降解DNA。用预冷乙醇固定细胞是为降低温度,在低温下进行处理使其减少DNA的降解,才更易使DNA进行沉淀从而进行降解。
高渗透的小分子非极性物质,他固定细胞,主要是因为其可以迅速渗透到细胞内部,杀死细胞(原生质)固定微细结构,渗透力强,可使材料变硬。
不是所有的观察标本都需要染色:染色的标本虽然能够增加标本的色度和色差,但在固定、染色过程中由于化学作用的缘故,也会使一些内部物质的形态和分子结构发生变性而失真,从而影响观察的真实性。
作用:① 解离;② 析出提取含杂质较少的DNA。
为什么酒精可以穿透细胞,固定细胞形态?
穿透性强,抗原性保存好。穿透性强:乙醇固定细胞的原理是乙醇是一种小分子非极性物质,可以迅速渗透到细胞内部,能够维持细胞内抗原的原有状态,使细胞结构得以较好的保存,同时也有利于后续的染色实验。
冰醋酸:5%水溶液可作固定用。不能沉淀白蛋白,但能沉淀***白。渗透性强,固定快,能使红细胞膨胀而破碎,常与其它液体配合使用。
固定细胞形态,酒精能迅速渗入组织和细胞将之杀死,使其形态结构和内含物尽可能保持生活时的完整和真实状态。
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